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Hydroxyproline assay 관련 질문 드립니다.
레벨1 평창군꽃등심 (과기인)
안녕하세요. 저희 연구실에서 Collagen 함량(순도) 테스트를 하기 위해 Hydroxyproline assay를 하고 있습니다.
sample은 Fish skin에서 collagen을 추출하여 TFF 필터 후 동결 건조한 collagen 을 사용하였고, Hydroxyproline assay결과 100mg collagen 에서 2mg의Hydroxyprolin(2%) 함유 되어 있다는 결과가 나왔습니다.
실험 방법은 100mg collagen을 6N HCl에 녹인 후 autoclave하여 sample로 사용 하였고 Oxidant Sol. , Ehrlich's Sol. 각각 500ul씩 사용 하여 흡광도 체크 하였습니다. Standard도 매 실험마다 다시 잡고 하고 있구요.
다른 논문 및 자료들을 봤을때 collagen (type 1)에는 10~13%의 hydroxyproline이 함유 되어 있다고 하는데 실험 결과 수치(2%)가 너무 낮아서 문의 드립니다...
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