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 전체 > Molecular Biology-DNA > Purification/Isolation
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질문 DNA extraction한 dna를 얼렸다 다시 전기영동
올챙이rhksdn(대학원생)  |  2019.06.17 18:57

dna를 열심히 추출하고 있는 대학원생입니다. 

 

bacteria에서 kit 및 pellet으로 dna를 추출한 직 후 잘 녹여서 전기영동했을시에 깨끗한 band가 잘 나온것으로 확인할 수 있었습니다. 

뽑아야할 dna가 많아서 1달정도 냉동실에 두고 이틀전에 뽑은것도 냉동실에 보관하였다가 오늘 녹여서 전기영동하였더니 band가 이전처럼 깨끗하지 않고 degradation된것처럼 나왔습니다. ㅜ

dna는 냉동보관하면 되는거지 않나요??
 

녹였을때 다시 잘 못 녹인건지 ㅜ 혹시 size가 큰 dna를 얼렸다 녹이면 이런 현상이 발생하는건지 여쭤보고 싶습니다. 

#dna
 
#molecular
 
#electrophoresis
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대왕개구리SPEED  |  2019.06.18   

사이즈가 작은 DNA보다 큰 DNA의 경우 냉동 후 해동해서 전기영동 확인을

해보면 분해되는 현상이 나타나기는 하지만 plasmid의 경우는 거의

분해되지 않고 CCC form이 조금 풀리기는 합니다.

그러나 gDNA의 경우 분해되는 경향이 일부 나타나지만 질문의 경우

전기영동 사진을 보지 않고는 뭐라 정확히 설명하기가 힘들것 같습니다.

알평창군꽃등심  |  2019.06.18   

smear현상 말씀하시는거 같은데 TE buffer or D.W에 녹여진 DNA를 Dilution 하여 다시 전기영동 해보시는게 어떤가 싶습니다.

저희 실험실에서 DNA 조각(fragmentation) 내는 실험으로 freezing&thawing을 반복 하여 실험 하였던 적이 있습니다.

올챙이ㅋㅅㅌ  |  2019.06.18   

-80도에 보관하는 RNA와 달리 DNA는 안정성이 커서 순도 높게 잘 분리했을 경우 상온보관해도 문제는 없었습니다.

여러 gDNA 스탠다드 샘플들 같은 경우도 냉장보관으로 수개월 이상 사용가능으로 되어있거든요.

저 같은 경우는 한달 정도까지는 냉장보관 했고 문제 없었습니다.

오히려 얼리고 녹이는 걸 '반복'할 경우 DNA fragmentation 가능성이 있다고 합니다. 다만 한두번 정도 얼렸을 경우는 문제 없었네요...

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