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질문 Gibson Assembly 후 amplify
알작재(대학원생)  |  2019.06.14 15:11

안녕하세요~ 처음 gibson assembly를 하는 대학원생입니다.

1kb 2개 1.7kb 1개 총 3개의 PCR product를 가지고 Gibson assembly를 해둔 상태입니다.

원래 gibson assembly를 진행하고 다시 pcr amplify 안하고 바로 transformation진행하나요? 

다른 연구자분들께서는 amplify나 size 확인도 따로 안하시는지 궁금합니다.

만약 amplify를 한다면 purification후 진행하는지도 알려주세요.

#Gibson assembly
 
#PCR
 
#purification
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.06.14   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 원래 gibson assembly를 진행하고 다시 pcr amplify 안하고 바로

transformation 진행하나요? 

: PCR이나 RE cut이나 확인 한 후 TF하는것이 좋습니다.

- 만약 amplify를 한다면 purification후 진행하는지도 알려주세요.

: 증폭하려면 정제를 거친 DNA를 사용하는 것이 좋지만 극미량의 DNA를

사용하기 때문에 high salt만 아니면 바로 증폭에 사용해도 될겁니다.

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