실험 Q&A Cell Biology > etc.
ROS assay blank control (배지만)의 형광도가 너무 높게나옵니다.
레벨2 진저브래드트윅스 (대학원생)
DCFH-DA를 처리하고 물질 트리트 후에 형광도를 찍는 ros assay 진행중입니다.
트리트 물질이 자세히 설명하긴 어렵지만 간단히 말씀드리자면 묾질a와 b를 반응시킨 결과물인데 원래는 control로 a만을 처리합니다. (선행연구에서도 control로 a만을 처리해 사용합니다)
그러다 한번 칸이 남길래 phenol free -배지만 넣어봤는데 거의 물질처리한 그룹 수준으로 ros값이 높게나옵니다.
실험 경향은 잘 나옵니다. (control (물질a) 대비 a+b 트리트시 ros증가)
전체적으로 보면 형광도가 con(a만)<<<<a+b저농도<(-)배지만<a+b고농도 수준입니다
참고로 cell은 hepg2 cell 사용하고, phenol free배지 쓰고, black 96 well에서 진행합니다. mtt값으로 보정도 진행합니다.
제가 뭔가 실험을 잘못하고있는걸까요??
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