[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
UCC공모전 출품작 홍보
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > Gene Cloning
조회 260  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 E coli가 아닌 strain에서 단백질 발현 방법
알YKim(과기인)  |  06.13 01:24

여러가지 박테리아를 사용하여 overexpression test를 계획중입니다.

E. coli에서는 T7 등의 commercial promoter system으로 단백질발현이 가능하지만, 그닥 유명하지 않은 균주를 사용해도 T7이 작동할까요?

첫번째 질문은

만약 pET vector를 사용한다면, 새 균주의 RNA polymerase가 pET vector에 잘 작동할 것인가입니다.  작동하지 않는다면 RNA polymerase도 벡터에 함께 넣어줘야 하는것인가요?

두번째 질문은

BL21(DE3) 가 아닌 균주에서 IPTG induction 은 분명 안될것으로 생각되는데, 최근에 해 보았던 테스트에서는 pET vector + IPTG가 작동을 하더군요.  lactose를 사용하는 균주라면 BL21(DE3)가 아니라도 T7 + lac operator 가 작동하는것으로 생각해도 되는것인가 입니다.

 

제 전공분야를 좀 벗어나니 많이 버벅댑니다. 도움 감사드립니다. ^__^

#프로모터
 
#wild type strain
 
#iptg
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

pET vector를 E. coli외의 균주에서 단백질 발현용으로 사용하려면

1. pET vector의 ori.가 발현 균주에서 인식이되어야 합니다.

2. T7 RNA polymerase가 생산 되는 균주이어야 합니다.

IPTG 유도는 promoter 문제가 아니라 LacO 조절 영역과 LacI의 product 간의

문제입니다.

따라서 BL21(DE3)가 아닌 균주에서 pET vector가 작동하려면 균주에서

T7 polymerase가 생산되면 가능합니다.

대왕개구리SPEED  |  06.13 01:58  
답변하기
할인행사 광고 검색광고
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
OMNI Homogenizer 20% 할인 이벤트 (12.31까지)
싸토리우스코리아바이오텍 싸토리우스코리아바이오텍
피펫 3+1 & 구매 인증샷 이벤트 (10.31까지)
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
5/6  좌우
130,00065,000
101,90097,000
49,700
286,700
113,500108,000
82,800
231,000219,000
137,600131,000
121,700
123,900118,000
286,700
668,600334,000
107,200102,000
231,000219,000
286,700
286,700
286,700
286,700
79,80076,000
144,900138,000
50,50048,000
218,200
180,700172,000
56,70054,000
최근등록   더보기 >
1mol/L 인산 만드는방법 알려주세요   09.17
NO assay standard cuve   09.17
streptococcus pneumoniae 배양관련 문의 드립니다.   09.17
PCR 실험   09.17
Bio-Rad의 Econo glass 컬럼 사용해주신 분 있으신가요?   09.17
RNA-> protein 될 때 질문이 있습니다   09.17
두 buffer가 다를 때 control 설정   09.17
EMEM조성에 대해 질문드립니다   09.17
세포주 분양 관련 문의 드립니다   09.17
UVB 조건에 대해 문의   09.17
아이빔테크놀로지
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아