mouse cancer cell을 주입해 보면 어떨까요? Human cancer cell이 마우스에서 잘 자라는 게 더 이상하지 않나요? 물론 뉴드 마우스라고 해도 말이죠.
항암제 개발 시 human cancer cell을 사용하여 mouse xenograft model을
만듭니다.
토대가 되는 프로토콜이 랩에 있는지 모르겠네요.
전에는 잘 되던 것이 갑자기 안되는 건지, 처음 해보는데 안되는 건지가 포인트가 될 수도 있겠네요.
주입하는 셀 숫자가 충분한지 비교체크해 보시고 표피를 확실히 뚫고 주입이 됐는지도 체크해보셔야 겠네요. 상피 바로 아래에 주사가 되었다던지... 물론 여러마리를 모두 그렇게 주사하기도 쉽진 않겠지만...;
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mil212
(비회원)
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19.06.14 17:20
Cell 수는 충분한지,
Cell을 떼서 injection 하기까지 너무 오랜 시간이 걸린것은 아닌지,
Cell의 mycoplasma나 상태는 fresh한지 등 체크해 보셔야 할 것 같고
Cell을 injection 전날 한번 나누어 주세요.
Growth curve가 올라갈 때 injection 하도록
cell이 많이 필요하다고 해서 너무 꽉 차도록 두었다가 injection하는것보다는 낫더라구요
그리고 아니였으면 하지만 특정 동물납품업체의 nude mouse의 경우에서만
질문자님과 같은 현상이 발생하기도 하더라구요.
최후의 방법이지만 업체를 한번 바꿔서 주문해보심도 고려해보시길 바랍니다.
Balb C nude mouse는 athymic mouse로 T cell 이 결핍된 상태라 이종인 human cancer cell line을 이식해도 종양 형성이 가능함.
하지만 암세포 제거에 중요한 역할을 하는 NK 세포는 존재함.
Xenograft에 사용한 cancer cell line이 mycoplasma에 감염된 경우 혹은 감염 후 잠복 상태라 할지라도, NK cell lysis에 취약하게 됨.
뿐만 아니라, 감염된 cancer cell에 존재하는 mycoplasma는 IFN과 같은 cytokine을 증가시켜 mouse의 면역반응을 강화할 수 있음.
Mycoplasma는 T cell independent하게 IgM과 같은 항체를 생성할 수 있어, NK cell에 의한 cytotoxic한 cancer cell lysis를 유도할 수 있음.
Mycoplasma에 감염된 cancer cell을 Balb C nude mouse에 이식한 경우, 1~2주 정도 증식하다가, mouse의 NK cell에 의해 제거되어 종양이 사라질 수 있음.
동물 실험에 사용하는 cancer cell line은 사용 전에 반드시 mycoplasma test를 진행하여야 함.
만약 검사를 하지 않은 세포를 사용하였고, 앞서 언급한 증상을 보였다면, 먼저 사용한 cancer cell line에 대해 mycoplasma 감염 여부를 확인해 볼 것.
Needle gauge 숫자가 너무 높은걸 사용하시면 세포를 다 터뜨릴 수도 있으니, 그 부분도 확인해보세요-