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질문 플라스미드 DNA 전기영동 관련
알자고싶다고(과기인)  |  06.11 17:51
첨부파일 파일첨부: IMG_1281.JPG (1.70 MB)
이미지 첨부파일

플라스미드 DNA를 분리하고 전기염동을 한 사진입니다                          lane 1이 Lsmbda DNA/Hind III/EcoRl cut size marker                                2~4까지 프라스미드                                                                      5~12까지 제한효소로 처리된 플라스미드                                              13이 100 bp ladder DNA size marker을 넣고 전기영동 했습니다

플라스미드의 크기와 insert의 크기를 추정하고 size maker의 크기와 이동거리와 플라스미드와 insert의 이동거리도 측정한뒤 표준곡선을 그려야 되는데 하는 측정하고 표준 곡선 그리는 법좀 설명부탁드립니다

#플라스미드 DNA
 
#전기영동
 
#플라스미드 DNA 전기영동동
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

insert는 양쪽 마커의 이동거리를 기준으로 계산이 될것 같으데 vector의경우

100bp 마커를 벗어난 분자량이라서 오른쪽에 lane 1의 마커가 있으면 좀더

정확한 계산이 가능할것 같습니다.

1. 제한효소로 자른 DNA를 well에서 이동거리 별로 거리를 측정하여 마커의

경우 각 분자량 대비 이동거리를 식으로 계산가능하며 측정하고자 하는

DNA의 이동거리를 식에 대입하면됩니다.

2. 그리고 양쪽 마커를 같은 분자량 끼리 선으로 연결해서 목적 DNA의 위치가

어느 분자량 마커와 비슷한가를 보고 분자량을 계산할 수 있습니다.

어느 방법이든 전기영동에서 분자량 측정은 어느정도의 오차를 포함하고

있습니다.

대왕개구리SPEED  |  06.11 18:03  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

vector는 약 4.3kb 부근

insert는 약 1kb 부근이 나오네요..

 

upload_image

대왕개구리SPEED  |  06.11 18:40  
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