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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 gel에도 앞뒤 구분이 있나요?
뒷다리lovedanial(대학생)  |  06.11 11:11

western blot시

gel에 로딩후, transfer 할때 앞뒤 구분이 있는건가요?

아니면 앞뒤 상관없이 transfer해도 되는건가요?

 

transfer하고 난 후에는 앞뒤( protein 붙은 부분, 안붙은 부분 )구분이 생기는 거죠?

#etc
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

1. 앞뒤는 없습니다.

2. 보통 프리스테인 마커를 사용하고 마커의 색상이 있는곳이 트랜스퍼된 면으로 판단하시면 됩니다.

금개구리안재진  |  06.11 11:16  

앞, 뒤는 없구요.. 보통(?) 프리스테인 마커를 사용한다는데 저는 잘 사용

안하기 때문에 좌, 우를 항상 멤브레인에 표시해서 실험합니다.

대왕개구리SPEED  |  06.11 13:33  

하하하 스피드님의 답변에서는 언제나 고수의 품격이 느껴지네요

금개구리안재진  |  06.11 14:07  

고수의 품격은 아니구요.. -.-;;

처음 WB를 할때가 20년도 훨씬 넘은 옛날이라서

그때는 모든 marker가 stain되지 않은 것 뿐이었습니다.

그때 부터 멤브레인에 표시하는 것이 버릇이 되었습니다.

대왕개구리SPEED  |  06.11 14:33  

젤 두께에 균일하게 로딩되기 때문에 앞뒷면 구분은 없습니다.

멤브레인에 트랜스퍼 뒤에는 젤은 프로틴이 없고 멤브레인은 프로틴이 있다고 생각하시면 되겠고 단백질 래더의 색상들어간 마커 부분이 온전히 멤브레인에 트랜스퍼 됐으면 샘플 단백질들도 동일한 수준으로 트랜스퍼 됐다고 판단합니다.

 

젤의 앞뒤 보다는 젤의 좌우 구분을 위해 젤 좌상단 또는 우상단을 살짝 잘라주기도 하고 멤브레인의 좌우 한쪽 상단을 잘라서 분간하기도 합니다.

올챙이ㅋㅅㅌ  |  06.12 19:12  
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