[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
웨비나 모집
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > etc.
조회 171  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 pH에 따른 효소 작용 Gel electrophoresis 실험
알coca123(과기인)  |  06.10 04:31
첨부파일 파일첨부: untitled.png (131 KB)
이미지 첨부파일

DNA(pGL3-Basic), Cutsmart Buffer(10x), hind3, BamH1, D.W를 넣고 각각 HCl, D.W, NaOH를 넣었습니다. 그리고 37도에서 30분 incubation을 했고, Gel electrophresis를 했습니다. 

 

이 실험에서 2조에서 밴드가 하나만 나왔는데 이유가 뭔가요?

그리고 6조에서 1번의 결과는 왜 안 나왔을까요?

4조와 6조의 결과값이 왜 다른걸까요?

2조와 6조의 3번 결과에서 2조는 왜 위에 몰려있고, 6조는 밑으로 다 내려온걸까요?

참고로 환경, 조건 다 같았습니다.

 

살려주세요... 

#겔 전기영동
 
#ph에 따른 효소 반응
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.

pGL3는 대략 4.8kb 크기죠.

BamHI과 HindIII로 자르면 약 2kb와 2.8kb로 분리됩니다.

6조 2번을 보세요.

약 2kb와 3kb 근처의 밴드와 그보다 큰 희미한 밴드가 보이죠. 그 두 밴드가 BamHI과 HindIII로 잘랐을때 나와야 하는 밴드입니다.

맨 위의 희미한 밴드는 두 효소 중 하나에만 잘린 single cut 밴드입니다. partial cut이라고 보통 말합니다.

저런 한 효소로만 잘린 밴드가 나오는 것은 효소가 적게 들어갔거나 DNA가 너무 많은 양이거나 기타 다른 조건이 맞지 않아서일 것입니다.

4조 3번, 2조 2번은 역시 partial cut에 의한 single cut 밴드입니다.

2조 1과 3은 안잘린 밴드입니다.

 

제힌효소 처리에서, 제한효소별로 buffer가 다른 이유는 적정 효소반응조건의 salt 농도와 온도, 그리고 pH가 필요하기 때문입니다.

또한 DNA도 pH에 따라서 denaturation되버리면 제한효소가 자르지 못하는 경우가 발생합니다. 특히 low pH에서는 DNA가 depurination되기 때문에 제한효소가 자르지 못할 뿐만 아니라 DNA가 조각조각 나버려서 없어집니다. 아마 4조1번과 6조 1번이 그런 경우라보 생각됩니다.

대왕개구리강시  |  06.10 08:24  
답변하기
할인행사 광고 검색광고
싸토리우스코리아바이오텍 싸토리우스코리아바이오텍
피펫 3+1 & 구매 인증샷 이벤트 (10.31까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
5/6  좌우
668,600334,000
286,700
286,700
130,00065,000
113,500108,000
137,600131,000
107,200102,000
180,700172,000
144,900138,000
231,000219,000
49,700
79,80076,000
123,900118,000
218,200
56,70054,000
286,700
286,700
101,90097,000
82,800
231,000219,000
286,700
121,700
50,50048,000
286,700
최근등록   더보기 >
IPTG induction 후 균 lysis 시,,   08.23
splicng이 없는 유전자는 rt pcr primer를 어떻게 짜나요?   08.23
균 운동성   08.23
pBluescript II SK + vector 구입처 찾습니다 ㅠㅠ   08.23
Sinapic acid성분을 분석할 수 있는 분광광도법 있나요??   08.23
용액에 따른 DNA 농도 비교실험   08.22
시액 같은말인가요~~?   08.22
전기영동 밴드가 하나도 안보여요   08.22
식물세포 formaldehyde 고정 후 보관   08.22
마우스 뼈조직에서 RNA 추출   08.22
오송첨단의료산업진흥재단
투표진행
Q. Cell line 배양시 FBS 제조사마다 차이가 있다고 생각하시나요? 동물세포 배양에서 특별히 요구되는 FBS가 아니고 실험자가 많이들 사용하는 셀라인의 경우 제조별 FBS가 세포 배양에 영향을 미칠까요? 물론 제조사의 endotoxin의 level은 같다라고 가정하고 질문을 드립니다.
참여하기
제품평가
[코넥스트]
TDZyme (Collagenase)
코넥스트
모집인원: 25명
모집기간: ~8/30까지
신청조건: Collagenase를 이용하여 조직으로부터 세포를 분리하는 실험을 수행하는 연구자
평가자 혜택

- 참가자 전원 5만원 상품권 제공
- 우수평가자 5명에게 10만원 상품권 추가 제공

제품평가자 모집중
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS