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 전체 > Molecular Biology-DNA > DNA Modification
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질문 DNA 추출 실험 질문입니다.
알은자(과기인)  |  06.09 18:00

DNA 추출 실험을 질문입니다.

 -Buffer AW1(wash), - Buffer AW2(wash), - Buffer AE2(elution)

 - Buffer ATL(tissue lysis), - Buffer AL(lysis), - Proteinase K의 약자를 알 수 있을 까요??

 

 그리고 DNA 농도 계산시( DNA 농도: A260 50 희석배수 = x ) 50을 왜 곱하나요??

 

#DNA 추출 실험
 
#dna
 
#Wash buffer
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채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

질문에 나와 있는 buffer 이름이 모두 약자로 나와있는데 어떤 약자를 의미

하나요?

그리고 dsDNA 정량을 위해 A260에서 흡광도를 측정하는 것은

실험으로 순수한 dsDNA의 경우 A260에서 1이 나올 때 50ug/ml이라고 측정이

되었기 때문에 그 결과를 이용합니다.

DNA 용액에 단백질이 혼입되어 있을 경우 A260에서도 단백질이 측정되기

때문에 순도가 떨어지는 DNA의 경우 50ug/ml에서 실제 농도는 떨어집니다.

대왕개구리SPEED  |  06.09 18:48  

 시료의 풀네임이 궁금합니다 ㅠㅠ

알은자  |  06.09 19:31  
“시약” 이름은
제조사에서 임의로 붙인 것이어서 큰 의미가 없습니다.
각 시약의 뒤에 직접 적어놓은 설명과 연관지어 보세요. 대충 힌트는 되겠죠?
개구리느림보  |  06.10 12:50  

업체 키트 시약명 및 구성성분은 업체 기밀이므로 알기는 어렵습니다.

다만 DNA 추출 같이 단순한 실험은 키트를 사용하지 않는 매뉴얼 기법과 거의 유사하며 이를 통해 단계별로 시약의 구성을 짐작해 볼 수 있습니다.

 

Wash 버퍼들 같은 경우는 Isopropanol 계통의 알코올 성분 혼합액일 것이고, Elution 버퍼 같은 경우는 DNase free water 일 겁니다.

Lysis 버퍼들은 계면활성성분을 가진 조직/세포 분해용매고 Proteinase K는 그 자체구요.

 

보통 저 버퍼들은 특별한 것 없기에 별도 구매 및 자체제조가 가능하지만 DNase, RNase 오염 관리하는 것이 꽤나 번거롭기에 구매해서 사용하는 경우가 많습니다.

올챙이ㅋㅅㅌ  |  06.12 19:32  

ATL (Animal Tissue lysis) 끝.

여기서 최초 만든 사람이 의도한 A는 Alkaline 이겠지만, 장사치들은 멋진 이름을 원하죠, 아이뻐나, 갠역시처럼 

하루카이  |  06.13 07:47   
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