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vector, insert 농도의 적절한 값 보다는 실험에 사용 가능한 양이면 아무런
문제가 없습니다.
Vector가 38.1ng/ul , insert가 183.0ng/ul 이정도 양이라면 충분히 사용가능하고
사용량을 정하려면 vector, insert 크기를 알아야 합니다.
vector 크기는 5.5kb 이며 insert는 0.213kb입니다!!
vector : 5.5kb, insert : 0.213kb이고
말단 비율 : V=1, I=3으로 할 경우
먼저 V, I를 1 : 1 무게로 혼합하면
5.5 / 0.213 = 25.8배 insert의 말단이 많습니다.
즉 1 : 1 말단으로 혼합하려면 vector 양의 25.8배 적게 insert를 혼합하면됩니다.
insert를 vector보다 3배 많게 혼합하려면
25.8 / 3 = 8.6배, vector 양보다 8.6배 적게 insert를 사용하면됩니다.
DNA 양이 Vector가 38.1ng/ul , insert가 183.0ng/ul이므로
vector를 3ul 사용하면(114.3ng) insert는 114.3/8.6 = 13.3ng을 사용하면
됩니다.
insert 13.3ng은 13.3 / 183 = 0.074ul를 사용해야 합니다.
0.074ul를 취하기 힘들기 때문에 insert를 10배 희석해서 0.74ul를 사용하면
됩니다.
따라서 V : I = 1 : 3, V=3ul, I=10배 희석 후 0.74ul를 혼합하면 됩니다.