실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
heat shock 42°C 에서 시간은 어떻게 정하시나요?
레벨1 Bioinformatiker (대학원생)
HB101 에 재조합된 plasmid transformation 하여 c-cell 제조하여 LB/amp/ara 배지에 배양하는 실험을 하고있는데요, CaCl2 으로만 cell competent 하게 하였는데, heat shock 45s 동안 했습니다. transformation 한후 LB 에선 자랏는데 LB/amp/ara 에서 아예 배양이 안돼서 이번엔 TFP - method RbCl2 이용하는방법 해보려고하는데, protocol 마다 heat shock 시간이달라서요 어디선 30s 이상하지말라고하고 어디선 90s.. heat shock 을 너무 길게해도 아예 배양이 안된다고 bric에서 읽은것 같은데.. 조언 부탁드립니다!
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