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질문 HEK293 cell에 co-expression 해보신 선배님들께 조언부탁드립니다.
알정병석(대학원생)  |  05.16 12:09

Ion channel과 Gi-coupled GPCR co-expression을 진행하고있습니다.

채널에 GFP로 형광표지를하고 receptor에는 별다른 표지를 하지 않았는데요..

channel만 단독으로 발현하였을때는 발현율이 굉장히 높은데, co-ex를 하였을때는 정말 발현률이 1/1000이하로 떨어집니다 ㅠㅠ

12well plate에 500ng씩 1:1의 비율로 넣는데요. 혹시 다른분들은 이 비율을 얼마정도로 넣으시는지 궁금합니다.

 

아니면 혹시 duet vector에 시작코돈-리셉터-종결----시작코돈-채널-링커-형광- 종결코돈 을 발현하면

 

e.coli가 아닌 hek293에서도 발현이 잘 될수 있는 벡터가 있을가요?

 

이 외에 발현률을 높일수 있는 방법이 있다면 도와주십시오ㅠㅠ

#expression
 
#coexpression
 
#kit
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