실험 Q&A Immunology > Immunofluorescence
살아있는 세포에서 IF(Immunofluorescence) 가능한가요?
레벨5 대학원생인가노예인가 (대학원생)
마우스 배아줄기세포를 이용해서 다음과 같이 실험을 계획하고 있는데요,
분화시킨 세포라서 움직이는 모습을 형광으로 보여주고 싶은데 GFP 태깅과 같은 실험기술이 실험실에 셋업되어 있지 않아서요 ㅜㅜ
실험 방법을 다음과 같습니다.
1. Formalin 고정 생략
2. Blocking: 10% FBS + DMEM (fresh하게 제작)
3. 1차 antibody 처리: 10% FBS + DMEM+ 1차 antibody (2시간)
4. PBS washing 세척
5. 2차 antibody 처리: 10% FBS + DMEM+ 2차 antibody (2시간)
6. PBS washing 세척
7. 현미경 관찰
세포가 죽지않고 타겟 단백질이 잘 발현될까요? ㅠㅠ
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