실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > mRNA Analysis
RNA 전기영동 관련 문제입니다 ㅠㅠ도와주세요
레벨1 florentia (대학원생)
저는sgRNA oligo 합성 실험을 하고 있습니다.
우선 1. 합성된 oligo DNA를 RNA로 합성하기 위해 MEGAshortscript kit를 이용해 RNA합성을 한 후
2. MEGAclearkit를 사용해 purification을 실시
3. RNA 60도에서 15분 처리 후 agrose gel에 로딩
이렇게 하였는데요 나노드랍으로 측정한 농도와 gel에서 보이는 농도에 너무 차이가 심해서 뭐가 문제인지 모르겠습니다. 지금 이실험을 두달째 똑같은 결과로 반복하고 있는데 뭐가 문제인지 너무 답답합니다.ㅠㅠ
첫번째가 농도가 3000ng/ul정도 나오고 두번째 샘플은 1500ng/ul정도 나왔는데 농도와 전기영동 사진의 밝기가 잘안맞는거 같아서 질문드립니다ㅠ
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