실험 Q&A Cell Biology > Transfection
Lentivirus production 시 293FT cell 상태
레벨1 삼삼오오 (대학원생)
현재 Lentivirus를 만들고 있는데요. 한번 만들어서 항생제로 확인했고, western으로도 KO가 된 것을 확인해서 바이러스가 정상적으로 만들어진 것을 확인하였습니다.
그리고 다시 바이러스를 만들기 위해 protocol대로 packaging plasmid를 넣어주고, 8시간 뒤 fresh media로 change 해주었는데요. 약 2시간만에 아래처럼 cell들이 뭉텅이로 plate에서 떨어져 나가 말리는 현상이 나타납니다.
제 생각에는 cell이 100%로 꽉 차 있었고 plasmid를 넣어주게 되면 293FT cell들이 부풀어 오르는 현상이 일어나면서 cell들이 떨어지지 않았나 싶은데요.
plasmid를 넣어주기 전에는 떨어진 cell이 없었고, media를 change 하면서 부터 cell이 떨어집니다. change 하자마자 떨어지지는 않았구요.
혹시 아래처럼 저와 같은 현상을 겪어보신 분이거나 혹은 다른 분들의 조언을 구하고자합니다.
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