실험 Q&A Microbiology > Bacteria
식품의 항균물질에 대한 MIC 측정
레벨2 레야 (대학원생)
안녕하세요.
식품을 시료로 항균효과를 측정하고 있는 대학원생입니다.
먼저 시료는 추출물이 아닌 농축액으로 실험하는게 좋겠다고 하여 농축액으로 MIC를 측정하고 있습니다.
멸균한 test tube에 식중독균 4종(B. cereus, E. coli, S. aureus, 살모넬라) 1 mL와 시료 농도별 1 mL씩 넣어 vortex 후 96-well plate에 0.2 mL씩 넣어 O.D.600 을 측정하고, test tube를 배양기에 넣어 37도 24시간 배양한 후 다시 96-well plate에 0.2 mL 넣어 흡광도를 측정하고있습니다.
시료 자체의 색 때문에 농도가 높을수록 값이 급격히 증가해서 '시료+0.1% 펩톤(균 희석시 사용)' 또는 '멸균증류수(시료 희석시 사용)+균'을 대조군으로 사용하여 실험군에서 대조군 값을 뺀 값으로 계산하고 있습니다.
이렇게 실험하고 계산하는데 농도가 높을수록 항균물질이 많으니 배양후-배양전 값이 낮아져야할 것 같았으나, 어떤 균에서는 농도 제일 낮은 곳에서 값이 가장 낮거나, 중간 농도에서 가장 낮거나 합니다... 그래서 96-well plate에 넣었던 것을 그대로 배양기에 넣어서 배양 후 흡광도를 측정했는데 계산해보니 앞의 실험과 별 차이 없더라구요...
실험방법이 잘못된 건가 싶기도 하고, 농축액 색 때문에 흡광도 값이 제대로 안 나온 것 같은데, 어떻게 하면 MIC 실험을 정확히 할 수 있을까요??
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