실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
약간 다른 band들이 보이지만 아쉬운대로 진행되도 되지 않을까
합니다.
좀더 깨끗하게 RNA 추출이 될것도 같지만 Real time 전에
GAPDH만 cDNA -> PCR해서 band가 잘 증폭되는지 확인해보는것도
좋지 않을까요?
추출상태를 보면 mRNA가 분해되고 그러지는 않을것으로 보입니다만..
GAPDH가잘나오면 안심하고 Real time을 진행해도 될것 같습니다.
RNA work을 많이 해보신분들 혹은 저는 자기가 가지고 있는 프로토콜에서 GAPDH가 몇 사이클에서 뜨는가로 보통 RNA 의 퀄리티를 판단합니다.
예를 들어 같은 프로토콜로 GAPDH가 20~22 나오면 good 22~24 나오명 그럭저럭, 만약 25가 넘으면 재실험 이런 자기만에 기준이 있습니다.
물론 25에서 CT(CP)가 나온다고 질이 완전 나쁘다는 할수 없겠지만 몇번 하다보면 자기만에 기준이 생길것입니다.
질문자의 RNA가 좀 깨진것 같다고 해서 더 진행안하시고 버리실건가요? 일단 한번 가보는게 맞지 않을까 합니다.