실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
PCR 결과 해석
레벨1 rr (대학원생)
위 사진의 유전자의 크기는 ORF 1600bp입니다.
ORF primer 에서 pcr이 되지 않아서 무엇이 문제인지 확인해 보기 위해 positive control(GAPDH)과 inner primer를 사용하여 pcr을 한 결과 positive control(GAPDH)과 inner primer는 각각의 bp에 맞게 밴드가 떳지만 ORF primer에서는 뜨지 않았습니다.
이 결과를 보고 primer 문제인가 싶어 ORF F+ inner R, ORF R+ inner F 조합으로 PCR을 시도해 본 결과입니다.
*positive control(GAPDH)과 inner primer의 bp는 200입니다.
*ORF F+ inner R 크기는 500bp, ORF R+ inner F 크기는 300입니다.
cDNA에서 inner가 아무것도 뜨지않은건 빠져나간건지 아니면 pcr이 된건지 안된건지 의아하고, gDNA에서 inner 와 GAPDH에서 200bp쯤에 밴드가 겹쳐서 떠 있는데 다른 부분에서도 200bp 부분에 밴드가 떠 있어서 pcr이 정확이 됬는지 안됬는지 헷갈립니다. (inner와 GAPDH에서 PCR이 정확히 되었다면 그럼 ORF F+ inner R, ORF R+ inner F 에서는 밴드가 뜨면 안되는데 왜 떠 있는지 모르겠습니다..) 아직 결과를 보는 법이 많이 서툴어서 결과 보고 답변 부탁드립니다!
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