실험 Q&A Cell Biology > etc.
cell count 계산
레벨2 chaeyeonim (과기인)
cell count를 할 때,
1. centri를 한 후, 상층액은 suction해서 버리고 밑에 남은 세포를
1ml DMEM-PF를 넣은 후, 잘 풀어줍니다.
2. 보통 ep tube에 90ul를 넣고, cell를 10ul를 넣어서 희석하고
3. 염색약 10ul와 ep tube에 희석한 cell 10ul를 넣습니다.
그래서 계산식이 cell 수/칸 수*10*2*10^4 이렇게 세는데,
다른 분께서 1번째 단계에서 1ml를 넣고, 풀어준 후에 배지를 9ml를 넣어서 10ml로 해서 2번째와 3번째단계는 동일하게 진행하면
cell seeding시에 배지의 양이 덜 들어서 seeding rocking을 할 때 cell이 가운데로 잘 안뭉친다고 하고 여태 2번의 반복실험을 통해 이 방법이 가장 좋다고 생각이 들어서 이 방법으로 진행할까하는데,
Q. '1번째 단계에서 1ml를 넣고, 풀어준 후에 배지를 9ml를 넣어서 10ml로'이 부분에서 cell count 계산식에 왜 *10이 포함이 안되는건가요?
저는 여태 1ml의 배지만 넣어서 희석배수가 1이라 생각되어, 계산값에 포함을 시키지 않았는데 배지를 9ml까지 넣어서 총 10ml의 배지를 넣었으면 10이라는 희석배수가 나와야 하는게 아닌가요?
cell 수/칸 수 *10(ep tube)*2(염색희석)*10(cell 푸는 과정 중)*10^4
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