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FACS 더블스테이닝 질문드립니다.
레벨5 안녕난세포야 (대학원생)
안녕하세요.
FACS로 2개 항체를 double staining 하여 확인하고자 합니다.
항체는 총 2개이며, A(FITC), B(PE) 라고 하겠습니다.
(각 항체는 unconjugation 항체입니다.)
질문은 제가 준비해야할 샘플이
1. control 2차 ab만 붙인 것. (FITC+PE)
2. A 항체 + FITC
3. B 항체 + PE
4. A항체(FITC) + B 항체(PE)
이렇게 준비하는게 맞는지요, 아니면 1번은 필요없을까요?
그리고 저의 계획은 이렇습니다.
- 1번 샘플로 FSC, SSC의 voltage 잡는다.
- 2번 샘플로 FITC의 compensation을 잡는다.
- 3번 샘플로 PE의 compensation을 잡는다.
- 4번 샘플로 이미 잡은 compensation으로 최종 데이터를 얻는다.
입니다.
두번째 질문은 만약 2번과 3번샘플 없이 4번(double Ab) 샘플만으로 compensation을 잡을수 있을까요?
고생많으십니다. 답변부탁드립니다..
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