실험 Q&A Cell Biology > Transfection
Stable cell line 제작시 Protain targeting 관련 문제 질문드립니다.
레벨1 musa161688 (대학원생)
안녕하세요.
연구중인 receptor에 대한 ligand selectivity를 연구하고 있는 대학원생입니다.
최근 연구중인 연구중인 receptor를 과대발현 시킬수 있는 lentivirus vector를 구입하여 HEK293 cell에 viral transduction 후 western blot을 통해 stable하게 receptor protein을 발현을 확인하였습니다.
하지만, receptor의 agonist를 처리하였지만, 전혀 stimulation이 되지 않았고 FACS를 통해 과대발현된 receptor protein이 membrane에는 발현양이 없고, cytoplasm내에 존재하는 것을 확인하였습니다.
stable cell line 제작시 target하는 receptor protein의 localization에 대한 문제 해결방안을 부탁드립니다. 감사합니다.
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