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질문 Rat skin
알담뽀뽀(과기인)  | 2019.03.06 00:33
Rat skin을 파라핀 염색을 하려 합니다.

Skin을 떼서 4% PFA 에 담그어 냉징 보관을 4일이나 했습니다.
그런데 조직이 단단해 지지 않네요..

같은 방법으로 하고 실온 보관을 하였습니다.
하지만 역시 보직이 단단해 지지 않네요..

Rat skin 연구 하시는 선생님들 ~~
아떻게 고정을 하나요?
#Rat
 
#Skin
 
#파라핀
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리Favorite  |  2019.03.11   
늘 브릭의 질문 글을보며
원초적인 과학적접근을 먼저 생각한다면 해답을 스스로 구할수있을텐데 하는생각이듭니다.

먼저 PFA에 조직을 담그면 왜 단단해지나요?
PFA에 담구었을때 원리를 알면쉽죠.
단백질 아미노산 크로스링킹입니다.
스킨 전문가는아니지만 단백질이 많이없고 섬유질이나 지방이 많을수도있어서 그렇수 있거나.
보유하신 PFA 성분이 변하여 잘될것도 안될수도있겠죠? 이럴땐 파지티브 컨트롤하나 같이두고 간단히 실험하면되고요.
사실 며칠이나 냉장, 상온 보관만을 번갈아 해봤다는건 교수님 입장에서 실망스러운 어프로치 입니다. 역으로 온도를 높여본 근거는 무엇이냐고 되묻는다면 과학적 으로 답변할수 있으셔야합니다. 온도를 높이면 분자의 운동이 활발해져서 빨리침투되기는 하나 일반조직에서 같만 침투될수있기에 냉장에서 천천히 그리고 PFA가 상온에서 구조가 쉽게바뀌므로 냉장에서선호하는겁니다. 얼른 과학적인 다른 트라이를 해보세요.
스킨의 구조부터 잘 파악해보고 문헌을 많이 읽으시면 깊이있는 해답을 찾는데 도움이됩니다. 처음부터 아는사람은 없습니다. 하지만 질문을 스스로할때 과학적 사고를 가지는 훈련은 과학자로써 필수입니다. 이것이 단순 연구원과 학자의 차이입니다.
개구리지나가는사람  |  2019.03.13   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

안녕하세요.

질문에 대한 고충은 잘 들었습니다.

파라핀 염색이라하시면,

파라핀섹션후 H&E 염색을 말씀하시는건가요?

저는, Mouse skin에서 염증 실험을 H&E 염색을 통해 실험을 해본 경험이 있습니다.

하지만, 프로세싱 기계를 돌리기전에 4% 파라에 14~16시간동안 RT(상온)에서 고정시키는데, 만약 고정이 안됐다면, 제 생각에는 sol. 의 문제라고 생각합니다.

그 외엔 딱히 생각나는 이유는 없네요.

 

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