실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
일반 PCR buffer와 taqman probe Multiplex qPCR buffr는 조성이 완전다른가요?
레벨5 캐틀 (과기인)
PCR을 하다 급 드는 의문이 있어 여기에 질문해 봅니다.
multiplex PCR을 할때 일반 PCR용 PCR buffer와 Real-time PCR용 buffer는 다른 결과를 가져올 수도 있나요???
현제 multiplex Real-time PCR용 premix를 사용하여 임상검체에서 PCR 결과를 보고 있습니다.
그런데...일반 PCR용 taq과 buffer를 유연차 않게 사용하게 되었습니다.(실수로..사용하였음)
두 buffer간의 결과는 좀 다르게 나오는것 같습니다.
일반 PCR용 buffer를 사용하면, 36 ct 이후의 signal이 NC(D.W를 사용) 다수 나오네요....
(저희는 임상 검체에서 병원성 세균을 검출하는거라....40 cycle까지 PCR을 합니다.^^)
얼핏 찾아 보기로는 buffer의 조성 자체가 다르다는거 같던데.....
taq polymerase야 어차피 target을 증폭 하는거라...결과가 다른 부분에 크게 영향은 없는것 같고.... 영향을 준다면 buffer의 조성에 따라 달라질 것 같은데..
제가 예상하는 부분이 맞는지요???
아무 의심없이 그냥 qPCR용 buffer를 쓰다 우연한 실수 아닌 실수로 다른 일반 PCR용 buffer를 사용하다 보니...드는 의문이네요...
Buffer의 조성 차이에 따라 결과의 패턴이 바뀔수도 있는걸 보니....
qPCR용과 일반 PCR용의 buffer의 조성의 차이가나는 이유가 뭔지 궁금해서 질문 드립니다.
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