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질문 Paraffin-embedded pancreas tissue로 IHC 할때 조직 손상
알LABSKOP(대학원생)  | 2019.02.11 21:00
안녕하세요. 
현재 Paraffin-embedded pancreas tissue (disease model)로 IHC를 자주하고 있습니다. 
하지만 스텝을 진행할 수록 손상되는 조직샘플로 인해 결과분석에 있어 매번 애를 먹습니다.
주로 antigen retrieval 과정 직후의 워싱부터 이러한 현상을 겪어왔기 때문에,
연구 초반에는 citric acid (HIER manner)를 이용하던 방식을 수정하여 
최근 protenase K를 이용한 PIER 법을 적용해보기도 했습니다. 

하지만 이렇다할 효과는 없는 듯 보여 수화과정 내 인큐베이션 시간 단축,
각 스텝 내 워싱 시간 및 강도 최소화.. 그리고 드라이 오븐에 조직샘플 건조 (24~72 시간)
등등.. 이와 같이.. 이러면 잘된다 하던 방법들은 죄다 사용해봤던 것 같습니다.

더 다양한 조언을 구하고자 이렇게 질문 올립니다. 
부탁드립니다. 


#pancreas tissue
 
#IHC
 
#antigen retrieval
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
삽질많이함  |  2019.02.11    
파라핀조직으로부터 IHC..나오면 땡큐인데 안나오면 죽어도 안나온다는 이야기가 있을정도로..

일단 안티젠 리트리벌이 molecule 특성따라 달라서 뭐가 맞다! 라고 할수 없습니다.
버퍼와 pH 모두 영향이 있기 때문에

paper 검색을 통해서 혹시 최적화 조건이 있는지 찾아보세요
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