[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 sale 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
검색광고안내
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Immunology > Immunoprecipitation
조회 930  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 ChIP 실험을 위한 조직 Fixation 시 Over-fixation 가능성에 대해
개구리Marine(대학원생)  | 2019.01.31 15:09

ChIP 실험을 위해 조직을 고정 한 뒤, 이 후 Chromatin shearing 과정을 실험중에 있습니다.


1. 보통 조직을 고정 할 때, 4% formaldehyde 와 같은 고정액에 조직을 10분 정도 처리 한 뒤,
2. Glycine 이 포함된 Stop solution 을 10분정도 처리 후 조직 고정단계를 멈추어 주고,
3. 그다음 Washing 한 뒤 다음단계로 들어가게 되는데요.


이 때 2. 단계에서, 4% Fromaldehyde, + Stop solution (Glycine) 이 포함된 상태에서 원래는 5~10분 처리 이지만, 약 2~3시간 조직을 오래 보관하게 되었습니다.  


이렇게 진행 할 경우 너무 Over fixation 되어서 다음 단계에 영향을 미칠 수 있을까요?
아니면, Stop solution 을 처리 한 상태이므로 Fixation 은 더 진행되지 않는 것 일까요?


관련 경험이 있으신분께 고견을 구합니다!

#Fixation
 
#ChIP
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리유전학도^^v  |  2019.01.31   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Methods Mol Biol. 2009 ; 538: 409–423. doi:10.1007/978-1-59745-418-6_21

이 논문 4. Note >> 1 내용 읽어 보세요.

Fixation 조건을 실험적으로 결정해야 한다네요.


이 논문 내용으로 생각해 보면, "영향을 미칠 수 있다"가 됩니다.

개인적인 생각으로는 decross-linking만 잘 시키면 실험에 문제가 없을 것 같지만요.

참고하세요.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
케이비티 케이비티
Mixer, Dry Bath, Heating Block, Thermo Shaker, Shaking Incub.. (10.22까지)
다온비에스 다온비에스
내 소중한 세포를 위해 안심하고 맡길 수 있는 WOLF Cell Sorter를 경험하세요! (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
무료 샘플로 명품 NEB의 DNA/RNA Purifucation 성능을 경험하세요. / NEBulider®.. (9.29까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 하반기 프로모션 행사 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (12.31까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
Phenotype MicroArray™ - Live Cell 에너지 대사 & 감수성 프로파일링 (10.31까지)
브래디 브래디
[브래디] 초저온라벨 등 실험실용 라벨링 솔루션 (COVID19 안전사인 등) (10.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 Microplate Reader & Washer 할인이 쏟아진다! (12.31까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
6/6  좌우
136,000129,200
379,000
22,7006,900
201,30060,400
388,500116,600
139,000132,100
245,20073,600
887,200266,200
924,000
79,50075,600
238,70071,700
136,000
47,20044,900
50,00015,000
158,40047,600
309,000
739,000702,100
143,800136,700
555,000
246,60074,000
793,400238,100
80,40024,200
230,000
242,40072,800
최근등록   더보기 >
colony pcr한번만 도와주세요 ㅠㅠ   09.22
od 600과 e.coli에 대한 질문   09.21
유산균 내담즙실험   09.21
피브린 제거하지 않은 혈액을 구하는 방법이 있을까요?   09.21
*B16F10이용 a-MSH assay 프로토콜 확인해주세요*   09.21
염증성 cytokine 발현 실험할때 주로 사용하는 방법과 바이오마커를 알려주시면 감사하겠...   09.21
세포오염   09.21
동결건조기를 사용한 마우스 조직의 동결건조 방법이 궁금합니다.   09.21
Murine mesangial cell   09.21
cell sonication후, lysate에 흰색 부유물이 보여요   09.21
Terumo bct
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고