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질문 HPLC을 이용한 단백질 분석 관련 질문
알실험을알고싶어요(과기인)  | 2019.01.31 10:59
​이번에 제가 HPLC을 이용한 단백질 분석을 진행하게 되었는데요..


몇 가지 문제점이 생겨서 질문하겠습니다.


1. 시료에서의 단백질 추출
일단 제가 쓰는 방법은 시료를 증류수 추출 후, 원심분리를 하고, 상층액만 취해서 필터를 해서 분석에 진행하고 있습니다. 
근데 논문을 찾아보니 버퍼+효소를 이용해 추출하는 방법도 존재하고, SPE을 이용해서 분석하는 방법도 존재하는데 어떤 방법이 일반적인 방법인가요?

2. HPLC 분석 농도 질문
위와 연결된 질문입니다. 상층액 수분측정을 통해서 약 90%가 나왔다고 가정하면, 고형분의 함량이 약 10%가 된다고 가정했을때, HPLC 시료 농도가 1%(10000ppm)이라고 가정하면 저희가 측정하고자 하는 물질의 농도는 0.1%(1000ppm)이라고 가정해도 되는건가요?

답변 미리 감사드리고 좋은 하루되세요




#HPLC
 
#단백질 분석
 
#단백질 정량
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.01.31   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1. 시료에서의 단백질 추출
일단 제가 쓰는 방법은 시료를 증류수 추출 후, 원심분리를 하고, 상층액만 취해서 필터를 해서 분석에 진행하고 있습니다. 
근데 논문을 찾아보니 버퍼+효소를 이용해 추출하는 방법도 존재하고, SPE을 이용해서 분석하는 방법도 존재하는데 어떤 방법이 일반적인 방법인가요?

: 추출하고자 하는 시료에 따라 최적 추출 방법이 정해지기 때문에 전체 추출 방법을

설명하기가 어렵습니다.

2. HPLC 분석 농도 질문
위와 연결된 질문입니다. 상층액 수분측정을 통해서 약 90%가 나왔다고 가정하면, 고형분의 함량이 약 10%가 된다고 가정했을때, HPLC 시료 농도가 1%(10000ppm)이라고 가정하면 저희가 측정하고자 하는 물질의 농도는 0.1%(1000ppm)이라고 가정해도 되는건가요?

: 네..이론적으로는 그렇습니다.

그러나 고형분이 10%라 하더라도 시료 중에 단백질이 10%라는 것과는 별개의 의미 입니다.

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