실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Purification/Isolation
플라스미드 PREP후 밴드가 DNA실종...
레벨1 YUMmYUMm (대학생)
안녕하세요
플라스미드 재조합하는 실험을 하고있습니다.
KM 내성 유전자를 가진 Vector plasmid에 insert를 restriction enzyme을 이용하여 cloning 후 transformation 하였습니다.
KM이 들어간 agar plate에 도말하였고, 여기에 발생한 colony를 대상으로 colony PCR 수행하여 insert가 들어간 plasmid를 가진 cell을 찾았습니다.
이 후 해당 colony를 찍어서 KM이 들어간 LB배지에 심고, plasmid PREP하여 뽑았습니다.
마지막으로 nano drop을 이용해서 농도를 측정하였고, A260/A280 ratio도 이상없이 완료 하였습니다.
그런데 이상하게 해당 DNA를 agarose gel에 내려보면 밴드가 전혀 없네요.
왜 이런 현상이 발생하는걸까요??
같은 키트로 같은 방법으로 프렙하여도 이놈만 계속 밴드가 없어집니다.
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