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정확하게 행동실험과 복강투여 경구투여 타임라인이 어떤지는 모르겠지만,
행동실험 자체가 워낙 손이 많이 타기도 해서 positive control로 사용되는 donepezil에서도 효과가 안나오는 경우가 종종 있어요.
혹시 실험실 선배들도 donepezil data를 얻는데 있어서 문제가 있는지요?
scopolamine과 donepezil은 항상 fresh하게 준비해서 사용하시는게 좋을 듯 하구요.
이런 마우스 행동실험 같은 경우들은 각각의 실험실의 setting과 주변 환경, 마우스의 스트레스 정도, 투약의 숙련도에 따라서 데이터가 다르게 나오는 경우가 많기 때문에, 참고문헌만 보고 dose를 따라서 하면 데이터 재현이 안되는 것처럼 보이는 경우가 있어요.
그렇기 때문에 scopolamine의 효과가 너무 강하다면 당연히 단회 경구투여 하시는 donepezil 로는 약물 효과를 보기가 힘들수도 있을 것이구요. 그래서 실험실에서 새로 이런 행동실험들을 새로 세팅중이라면 scopolamine 부터 좀더 낮은 dose 부터 dose dependent manner로 실험하시는게 좋을 듯합니다. 그리고 그에 따라서 다시 donepezil dose를 dose dependent manner로 실험하셔서 정하시면 될듯 하구요.
그리고 위에 말씀하신 세가지 실험들은 어떤 프로토콜은 사용하는지는 모르겠지만, 아마 단회투여로 결과를 보시려고 하지 않을까 생각되는데요. 그렇기 때문에, 좀더 확실하게 하시고 싶으시면, water maze 같이 쥐를 학습시키는데 몇일 시간이 걸리고 투여도 반복투여하는 실험을 하시면 좀더 확실하게 결과를 알 수 있지 않을까 싶습니다.
혹시 구입하신 donepezil 자체가 걱정이 되신다면 in vitro실험으로서 AChE inhibition 효과를 확인해보시면 donepezil 자체는 걱정 안하셔도 될것 같구요. 그러면 최소한 행동실험 관련된 프로토콜이나 실험자의 donepezil 경구투여 방식 선에서 문제점을 찾을 수 있겠죠?
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레벨1
맛좋은유자차
(대학원생)
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18.12.19 23:17
먼저 자세한 답변 감사합니다!
!
그전에는 다른 실험실에서 얻어온 donepezil을 사용하였는데, 그 때는 선배님들 모두 data에는 지장이 없었는데 그 시료를 이번에 거의 다 사용하였고, sigma에서 판매하고 있어서 구매하여 이 시료로는 저희 실험실에서 처음으로 setting 중입니다. Donepezil 효과 문제인가 하여 AchE inhibition assay를 진행해보았는데 문제는 없었더군요 ㅜㅜ
프로토콜을 다시한번 체크하고 Scopolamine과 Donepezil을 dose-dependant하게 나눠 실험을 진행하여 잘 나오는 dose에서 setting을 진행하여야겠습니다. 잘 나왔으면 좋겠네요...ㅜㅜ
친절하고 자세한 답변 다시 한번 감사드립니다!