실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Purification/Isolation
Gel Extraction!!
레벨2 rhksdn (대학원생)
sample을 PCR 증폭하여 단일밴드가 나오는 pcr product를 얻었습니다.
pcr volumn은 30ul 로 증폭햇습니다.
이것을 1% gel에 로딩한 후 단일 밴드를 slice하여 Q사의 kit를 사용하여 회수하였습니다.
Eppendorf BioSpectrometer® basic 를 사용하여 elution buffer로 멸균 D.W를 사용하기 때문에 blank를 잡고 로딩 전에 측정하였더니 약 500ng/ul정도 나오더라구요.
당연히 gel 로딩시 명확하고 진한 단일 밴드가 나왔습니다.
이것을 밴드 부분만 잘라서 무게를 다니 약 100mg정도 되었습니다.
그 이후는 Q사의 프로토콜 그대로 진행하였습니다.
근데 elution 후 동일한 방법으로 측정하니 10ng/ul도 안나오네요 ㅜ
뭐가 잘못됐는지 모르겠습니다 ㅜ 제발 알려주세요.
gel elution방법은 정말 나와있는 그대로 시행하였습니다 ㅜ
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