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레벨1
쓰성님
(과기인)
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18.12.09 19:32
네 모든 조가 안나왔습니다 ㅠ
모든 조가 안나왔다면 균이 plasmid를 안가지고 있던지..
protocol에서는 굳이 안좋은 step을 찾으라면 solution C(alkaline lysis method에서 sol. II)
단계에서 보통 45도 까지는 heating을 하지만 65도는 너무 높은 온도가 아닌지 모르겠네요..
너무 높은 온도에서 알카리 변성을 시키면 산성 salt 조건에서 plasmid가 2중 가닥으로
재생되지 않습니다.
그리고 high salt solution은 pH가 4.5~4.8사이의 용액을 사용해야합니다.
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레벨1
쓰성님
(과기인)
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18.12.09 19:58
SPEED님 답변 감사합니다!
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레벨6
Applied_Microbe
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18.12.09 20:59
Lactobacillus 면 boiling 이나 chelex 100 boiling으로도 PCR가능합니다
우선 타겟 plasmid 확인해보세요