[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 sale 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
검색광고안내
랩노트
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 1489  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 qRT-PCR negative control에서 ct가 뜰 때
올챙이야생의잉어킹(대학원생)  | 2018.12.06 23:06
안녕하세요! 비생물랩에서 혼자 pcr하느라 여기 실험게시판 큰 도움 받으며 살고있는 원생입니다.

miRNA의 qRT-PCR을 하는데요
두번에 한번꼴로 negative control(template cDNA 대신 버퍼를 넣음)에서 30 중후반의 ct값이 나와 거슬립니다.

다만 멜팅커브를 보니, 제 타겟의 멜팅포인트가 77.5도인데 이 위양성 커브의 멜팅포인트는 주로 76~76.5도 대로 나오기는 해요. 눈으로 보기에도 ntc 픽만 혼자 옆으로 삐져나와있는 형태이랄까요. 다른 언노운 샘플들은 77.5도에서 78도 정도로 잘 나옵니다.

여기 게시판에서 멜팅온도가 타겟이랑 같을 경우엔 젤을 내려보라고 하신 답변글을 봤는데, 저처럼 다를 땐 그냥 버퍼 오염이겠거니 하고 다른 샘플에서 나온 데이터들을 그대로 사용해도 되는 문제일까요...? 글 읽어주시는 모든 분들께 미리 감사드립니다!
#qRTPCR
 
#false positive
 
#ct
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
histone  |  2018.12.07    

primer dimer일 확률이 높아 보이네요.
gel 걸어서 non specific band인지 dimer인지 확인해보세요

올챙이야생의잉어킹  |  2018.12.07   
감사합니다. 그런데 ntc에서 primer dimer가 나오면 혹시 문제가 되나요...? 나온다면 ntc에서만 종종 나오고 분석대상 샘플들은 멀쩡히 잘 나오는 상태라서요.. 그리고 non specific band는 무슨 의미인가요...? 이게 나오면 안좋은건지... 그리고 non specific band와 primer dimer를 어떻게 구분할 수 있을지 궁금합니다...
답변하기
할인행사 광고 검색광고
케이비티 케이비티
Mixer, Dry Bath, Heating Block, Thermo Shaker, Shaking Incub.. (10.22까지)
다온비에스 다온비에스
내 소중한 세포를 위해 안심하고 맡길 수 있는 WOLF Cell Sorter를 경험하세요! (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
무료 샘플로 명품 NEB의 DNA/RNA Purifucation 성능을 경험하세요. / NEBulider®.. (9.29까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 하반기 프로모션 행사 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (12.31까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
Phenotype MicroArray™ - Live Cell 에너지 대사 & 감수성 프로파일링 (10.31까지)
브래디 브래디
[브래디] 초저온라벨 등 실험실용 라벨링 솔루션 (COVID19 안전사인 등) (10.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 Microplate Reader & Washer 할인이 쏟아진다! (12.31까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
2/6  좌우
22,7006,900
379,000
245,20073,600
793,400238,100
246,60074,000
388,500116,600
739,000702,100
143,800136,700
47,20044,900
136,000
230,000
79,50075,600
238,70071,700
50,00015,000
555,000
136,000129,200
158,40047,600
80,40024,200
139,000132,100
887,200266,200
924,000
309,000
242,40072,800
201,30060,400
최근등록   더보기 >
cell sonication후, lysate에 흰색 부유물이 보여요   09.21
DNA추출실험의 계면활성제, salt, 유기용매 조합에 따른 실험 결과의 차이를 알고싶습니...   09.21
동결보호제 glycerol 이용법 관련 문의 [비전공자입니다.]   09.21
실리콘 음극위 PVDF+NMP 코팅과 관련된   09.21
온도 60도 이상을 유지할 수 있는 장치   09.21
AU-PAGE gel로부터 단백질을 추출   09.21
pCMV6-entry vector - stable cell line 만들때 문제요   09.21
DNA추출 실험에서 사용하는 salt와 유기용매의 조건을 알고싶습니다.   09.21
T7 phage, T4 phage 구매업체 또는 구매가능한 방법 요청   09.21
분자생물학 실험서 추천 해주세요!   09.21
한국벡크만쿨터
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고