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질문 전기영동 관련 질문 드립니다. 도와주세요
알dreamjw0211(대학생)  |  2018.11.30 22:35

안녕하세요
궁금해서 문의합니다.
두개의 band가 있는데 그 두 band 차이가 1kb(단백질은 1kD) 밖에 안날때
이 두 band를 나눌 수 있는 방법이 있나요??

#electro
 
#band
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2018.11.30   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

gel에서 elution 가능 유무를 말하는 겁니까?

단직 육안으로 구분이 가능한 걸 말하는 겁니까?

예를 들어 DNA 1Kb차이가 20K와 21Kb는 분리가 어렵지만 100bp와 1.1kb는 충분히

분리 가능합니다.

DNA 1Kb ladder marker를 보면 고분자량이 아니면 왠만하면 1Kb 차이를 분리하는건

쉽습니다. 

단백질의 경우는 고농도 acrylamide gel을 사용해도 10Kda이상에서는 1Kda 차이의

단백질을 분리하는게 어렵울거라 생각합니다.

하지만 10kDa 이하 단백질에서는 1Kda 차이의 단백질의 분리는 가능 할 거라 생각합니다.

단 20% 이상의 acrylamide gel에서 그렇고 열이 많이 나기 때문에 천천히 내려야 할

겁니다.

알dreamjw0211  |  2018.12.02   

정말 감사합니다.
단백질 20kDa 과 21kDa band를 육안으로 분리하고 싶은데 어려움을 겪고 있네요 ㅜㅜ

대왕개구리SPEED  |  2018.12.02   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

20Kda와 21Kda 단백질은 10X10 gel에서 분리는 어려울 거구요..

1. 사용 gel 길이 : 최소 20cm gel

2. gel % : >15%

3. sample양 : 20kda, 21kda 단백질 각각 0.1ug

4. staining : silver staining

위의 조건에서 분석하면 확인 가능할 수도 있습니다.

단백질이 아주 가늘게 나와야 하면 조금이라도 양이 많으면 두 band가 붙어버릴 겁니다. 

알dreamjw0211  |  2018.12.03   

감사합니다!!

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