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spin column을 사용해서 분리하는가요?
그리고 혹시 전기영동 사진이 있으면 볼수있을까요?
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레벨6
Applied_Microbe
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18.11.22 23:28
그람양성균들도 종류에 따라서 조금씩 다릅니다. 균 이름 알 수 있을까요?
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레벨1
하뿌웅
(대학생)
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18.11.23 14:10
streptococcus parasanguinis에요
키트사용 안하고 그냥 매뉴얼 방법으로 뽑았어요
분리된 결과는 전기영동을 보고 판단하는게 좋습니다.
gDNA + plasmid가 나오는 경우는 종종 있지만 gDNA prep.하고나서 gDNA가
안나오고 plasmid만 나오는 것은 prep.이 잘못된겁니다.
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레벨1
하뿌웅
(대학생)
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18.11.23 16:57
gdna도 나오긴 한데 plasmid가 진해서 genomic이 묻히는 상황이에요
다른 균들도 동시에 진행했는데 유독 저 균만 저러는 상황이구요
extraction을 하려해도 plasmid가 진해서 제대로 나오지도 않구 loss도 많을 것이라고 예상되어서 함부로 진행도 못하겠네요ㅠㅠ
왜 그러는지 원인같은건 알 수 없을까요??
gDNA와 plasmid가 같은 위치에 나온다구요?
아마도 아닐겁니다.
현재 분리한 gDNA가 분자량 어디쯤에 나오나요?
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레벨6
Applied_Microbe
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18.11.26 19:54
제가 썼던 방법인데 streptococcus pyogenes 를
Spin down 및 2회 clean up 후
급냉동과 급해동 3번 반복하고 gDNA 뽑았어요