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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 DAPI 염색 후 PCR?
알닉네임1234(대학원생)  | 2018.11.06 05:47
안녕하세요? 늘 눈팅하다가 질문하나 올립니다.

제가 선충을 DAPI로 염색하고 DNA를 추출해서 PCR을 하려고 합니다. 

DNA추출은 single nematode에서 분리해야되서 키트를 쓰지 않고 Proteinase K 들어간 solution으로

녹인 후 dilution 해서 하려 합니다. 


DAPI로 염색된 조직PCR 하는데 문제가 없을까요? Proteinase K가 DAPI를 아마 분해하고 dilution 되서 괜찮지 않을까 예상하고 있습니다.. 아직 Primer 도착 전이라 시도해 보기 전에 질문 남깁니다~!
#dapi
 
#nematode
 
#PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2018.11.06   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

DAPI가 PCR을 저해한다는 보고가 거의 안보이는 걸로 봐서는 PCR이 가능 할 수도

있겠습니다.

DNA 추출 후 chloroform 정제를 하여 DAPI 제거 후 PCR 하는 것도 좋을 듯 합니다.

그리고 단백질 분해 효소인 Proteinase K가 DAPI를 분해할 수 있을까요?

DAPI : 4′,6-diamidino-2-phenylindole

꽃개구리Applied_Microbe  |  2018.11.06   

DAPI보다는 잔류 proteinase K에 의해서 저해되지 않을까 생각드네요

열처리를 통해서 proteinase K의 기능을 죽인 후에 PCR 하시는것이 좋을 것 같습니다.

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