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 전체 > Buffer/Reagent
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질문 alpha glucosidase inhibition 을 하려고하는데 저희방에 alpha glucosidase activity assay kit가 있는데 둘이 완전 다른건가요?
올챙이두두두리(일반인)  |  2018.11.03 14:20
안녕하세요..

저희방은 박사님들이 다들 졸업하시고 텀이 조금있다가 제가 들어와서 석사 2학기생인 저혼자 실험을 해야합니다..

전해져 내려오는 프로토콜이 아예 없습니다...ㅠㅠ


교수님이 혈당관련 실험을 진행하시겠다고하시면서 alpha glucosidase inhibition을 실험하라고하는데 시약들을 찾아보니 alpha glucosidase activity assay kit가 그대로 있던데 둘이 완전 다른건가요??

혹여 다르다면 alpha glucosidase activity assay kit를 아예 사용할 수 없는 건가요?
괜찮으시다면 저에게.. alpha glucosidase inhibition 프르토콜을 알려주실 수 있는지... ㅠㅠ

혼자 실험을 하려니 아무것도 모르겠네요...교수님도 나몰라라 하시고...제발 도와주세요...
#alpha glucosidase
 
#alpha glucosidase inhibition
 
#항당뇨
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2018.11.03   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
alpha glucosidase inhibition 실험은 alpha glucosidase activity assay에서 시료를

처리하지 않은 군의 활성 대비 시료를 처리한 군의 활성으로  inhibition %를 계산할 수 있습니다.

예를 들어 시료를 처리하지 않은 군을 negative control, alpha glucosidase 활성을  inhibition하는

알고 있는 물질을 처리한 군을 positive control, test하는 시료를 처리한 군을 sample group으로

설정하여 실험합니다.

만약 negative control 활성을 100으로 해서 sample group의 활성이 60이 나왔다면 해당 시료는

40% inhibition rate를 보인다고 할 수 있습니다.

alpha glucosidase inhibition 프르토콜은 lab에서 사용하는 alpha glucosidase activity assay kit가

어떤건지 알수 없기 때문에..

현재 lab에 있는 kit는 사용가능 합니다.
올챙이두두두리  |  2018.11.03   
안녕하세요.

답변 진심으로 감사드립니다!

제가 지금 시약들을 찾아보니 Sigma 에서 산 alpha glucosidase activity assy kit입니다.
들어있는 시약들을 보니

- Assay Buffer, pH 7.0 24 mL (Catalog Number MAK123A)
- alpha -NPG Substrate 1.0 mL (Catalog Number MAK123B)
- Calibrator (equivalent to 250 U/L) 10 mL (Catalog Number MAK123C)

이렇게 되어있던데 혹시 프로토콜을 알 수 있는지 궁금해서 다시한번 질문하게 되었습니다.

또한 positive control, sample group은 이해했는데
시료를 처리하지 않은 군을 negative control군을 이해하지 못했습니다...ㅠㅠ
EtOH를 넣으라는 말씀이신지..ㅠㅠ 혼자 실험을 하다보니 질문이 많습니다...
다시한번 답변 부탁드리겠습니다.
대왕개구리SPEED  |  2018.11.03   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Protocol은 시그마에서 kit를 찾아보면 pdf로 다운가능합니다.

그리고 negative control은 sample이 녹아 있는 용매만 시료가 없는 상태로 동일 부피를

처리한 군입니다.

예를들어 증류수에 시료가 녹아 있고 20ul를 분석 했다면 증류수 20ul 만 넣은 군이

negative control이 됩니다.

올챙이두두두리  |  2018.11.04   

감사합니다!!!

덕분에 많은걸 배웠습니다.

올챙이두두두리  |  2018.11.11   

안녕하세요...

speed님 궁금한게 더 생겨서 답변으로 질문해봅니다..ㅠㅠ

제발 보셨으면 좋겠네요...

지난번에 많은 도움이 되었습니다.

이번에는 alpha amyalse inhibition 에 대해 실험하려고하는데..
저희방에 alpha amyalse activity kit (sigma) 가 있던데 지난번에 답변해주신 alpha glucosidase와 같은 방법으로 inhibition을 구할 수 있는건가 싶어서 질문드립니다...

답변을 한번더 부탁드리겠습니다...ㅠㅠ

대왕개구리SPEED  |  2018.11.11   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
네.. 효소 종류는 달라도 효소 반응 시스템은 동일 방법으로

적용 가능합니다.
올챙이두두두리  |  2018.11.12   

감사합니다. speed님

많은 도움이 되었습니다!!

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