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RT-PCR은 아니구요 일반 PCR 연습을 하고 계시네요..
PCR 자체는 정상적으로 잘 진행되었습니다.
전기영동은 얼마나 loading 한건가요?
Primer dimer가 남는 것은 반응 효율 상 증폭에 사용되고 남아서 그렇습니다.
증폭 후 안남아 있는게 좋지만 조금 남아 있는 경우도 종종 있습니다.
만약 PCR product를 사용하는 실험의 경우 정제하면 제거가 가능합니다.
현재 조건에서 54도 또는 52도에서 annealing 온도를 설정하면 primer dimer가 줄어들 가능성이
있습니다.
단 PCR product외에 비특이적 band가 안나오는지 annealing 온도를 낮춰 실험을 한번
해보세요.
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레벨6
Applied_Microbe
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18.11.02 20:30
Primer design수정은 못하시나요?
abiho@daum.net로 연락주시면 takara에서 발간한 PCR백전백승 보내드릴께요