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레벨5
어쩌구저쩌구
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18.10.29 16:36
1. Ab 선택: 회사는 크게 문제가 없습니다. 다만 어떤 회사의 제품은 background가 심하게 나오기도 하기 때문에 잘 알아 보셔야 합니다. 1st Ab가 mouse IgG라면 2nd Ab는 anti-mouse IgG, HRP를 구매 하시면 됩니다.
2. ELISA kit로 판매되는 것이 없다는 것이 detection하기 어렵다는 것을 의미하지는 않습니다. 시장성이 없어서 제품으로 만들지 않는 경우가 더 많습니다. 그리고 시판중인 ELISA kit는 미량 검출과 정확성을 위해 sandwitch ELISA 방식을 많이 사용하고 있습니다.
저희 랩도 초기엔 Kit이 아닌, 각각의 Antibody를 구매해서 ELISA를 많이 했었습니다.
(그때 당시엔, 지금처럼 bulk type의 kit이 별로 없었고, 가격도 비싸고 그래서요;;)
Antibody는 어느회사의 것이든 상관없었고,
Primary antibody 고를때 ELISA용으로 가능한것 고르시면 됩니다.
그런데, Standard가 Kit에서는 fragmentation된 형태로 제공이 되지만,
Manual로 따로 ELISA를 할때에는, 해당 단백질을 구매해서 standard로 loading해서,
그 단백질 구매비용이 좀 들었었습니다.
1. elisa 선정시 고려할점...
1st Ab와 2nd Ab 사이에 간섭이 중요합니다. 물론 여기서 중요한 요소는 1st 2nd 모두 똘똘한 항체인 상태에서 둘 사이에 간접이 없는것이 중요합니다.
2. 시중에 kit이 없다는것은 Ab 회사에서 elisa kit으로 출시를 안했다는것이지 그만큰 detection이 어렵다고는 할수 없습니다. 많이 안팔릴것 같으면 회사는 안만들수도 있죠