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luciferase reporter gene assay 질문있습니다
레벨1 qwerty11 (대학원생)
luciferase reporter gene assay와 dual luciferase gene assay 관련해서 질문있습니다.
1. luciferase reporter gene assay에서 luciferase 발현 후 세포 용해물을 동량으로 얻어서 같은 양의 세포 용해물 당 luciferase에 의해 나타나는 빛의 세기를 측정하는 것이 맞나요?
여기서 양을 통제변인하기위해 세포 용해물을 동량 쓰는 것이 맞는지 알고 싶습니다.
2. dual luciferase gene assay에서는 세포 용해물을 동량으로 맞추는 과정이 필요없다고 알고 있는데요. 그 이유가 Renilla를 이용하기 때문이라고 알고 있습니다. 그렇다면 transfection 후에 세포 용해물을 동량으로 맞춰주는 과정없이 luciferase/renilla 빛의 세기를 측정하여 세포 하나당 luciferase에 의해 나타나는 빛의 세기를 측정하여 mRNA발현 정도를 측정한다고 생각해도 되나요?
renilla 빛의 세기가 세포수에 비례하게 나타나서 이를 나눠주면 세포 하나당 luciferase 빛의 양에 의해 mRNA 발현량을 알 수있다고 생각했습니다.
답변 부탁드립니다. 감사합니다.
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