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괜찮습니다.
왠만하면 볼륨은 통일시켜주시는게 좋습니다.
단백질의 종류를 제외한 모든 조건을 똑같이 만들어야 합니다.
샘플과 assay reagent의 비율은 맞춰줘야 합니다.
그렇지 않으면 assay reagent의 최종 희석비율이 변해 assay range에 변화가 있기 때문입니다.
그냥 쉽게 설명을 드리자면....
먼저 BSA standard를 최종 부피 250 ul 에서 microplate로 A595 측정합니다.
그리고 standard (Y=aX +b) 식을 최소자승법이나 프로그램으로 구합니다.
Y = A595, X는 BSA standard 농도
두번째, 님의 샘플을 넣고 최종 250 ul로 맞춘후 microplate로 측정합니다 => Y
구한 Y로 부터 standard식에서 농도(X)를 구합니다.
그 농도에 희석배수 (만약 샘플이 50ul 이면 희석배수는 5 입니다)를 곱하면 됩니다.