[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
실험복 제공
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 707  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 토양에서 추출한 DNA PCR, qPCR 질문 드립니다.
알고민고민2(대학생)  |  2018.08.20 14:54
안녕하세요
토양에서 추출한 DNA로 미생물 실험 하고 있는 대학원생입니다.
저희가 미생물 특화된 랩이 아니라 몇가지 막히는 부분이 있어서 질문 드립니다..! 


우선 저희가 제작한 standard를 이용하여 rt-PCR을 진행하고 있습니다.
근데 문제가 efficiency도 잘나와야 80%정도에 머물고, melting curve도 보시다시피 몇몇 샘플에서 멜팅커브가 91도정도인데 85도에서 작은 픽이 나옵니다.
보시면 90도 부근에서 나오는게 샘플이고 약 91.5도 부근이 standard입니다.
upload image

이 그림에서 샘플이 standard보다 1도정도 낮은 곳에서 멜팅 픽이 형성이 되는데 이게 맞는건지, 그리고 그 옆에 85도 부근에서 나오는 픽은 어떤 것에 의해 형성되는지 궁굼합니다..


그리고 추가적으로 여쭙고 싶은 것이 저희는 mobio사의 DNA powersoil kit라는 제품을 사용하고 있는데 추출 후에 nano drop을 보면 260/280은 대부분 1.8~2.0대를 보이고, 260/230은 1.2~1.6정도의 범위를 보입니다. 농도는 25ng/nl~50ng/nl정도 되구요.
이정도 농도의 샘플로 PCR를 수행할 때는 어느정도의 희석이 필요한 것인가요? 
꼭 필요하다면 왜 필요한지가 궁굼합니다.


긴글 읽어주셔서 감사드립니다. 답변 부탁드립니다.! 
#토양
 
#DNA
 
#PCR
답변하기
첫 댓글을 달아주세요.첫 답변을 달아주세요.
답변하기
할인행사 광고 검색광고
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
nanoString nCounter Sprint 연말 특별 50% 할인행사! (오직 1대 한정!) (12.27까지)
아반토퍼포먼스머티리얼즈코리아 아반토퍼포먼스머티리얼즈코리아
100% 미국산 FBS 1병 구매시 혈청 피펫 1박스(400개) 제공! (12.25까지)
바이오클론 바이오클론
(1+1증정) WB, IHC-P 하신다면!? Primary ab 구매시 secondary ab 무료로 드립니.. (12.27까지)
랩가이드 랩가이드
연말 남은 예산 땡처리 기회! 빅세일 ★Tube/Pipet/Tip/Spreader/Scraper★ 지금 구매.. (12.24까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
에펜도르프 프로모션:원심분리기,피펫,PCR장비,분광광도계,Mixer,Tube 다양한 혜택을 받으세요. (4.1까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[Tecan] 우수한 흡광전용 Microplate Reader & Microplate Washer를 저렴하게.. (1.7까지)
라이카코리아 라이카코리아
[보상판매 이벤트] 현미경 사용 중이신가요? Leica 현미경을 35% 할인해드립니다! (1.4까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
βeta
2/6  좌우
11,50011,000
56,90054,000
186,300177,000
36,30034,000
89,60085,000
45,60043,000
93,70089,000
668,600334,000
82,80079,000
78,00074,000
36,30034,000
75,50072,000
117,600112,000
118,900113,000
56,30053,000
72,50069,000
218,200207,000
118,900113,000
121,700116,000
130,00065,000
49,70047,000
94,70090,000
185,200176,000
172,100163,000
최근등록   더보기 >
transformation후 plasmid prep까지 시간을 좀더 단축 하는 방법이 있을...   12.14
단백질 정제 관련 질문드립니다ㅠㅠ   12.13
붕해시험 할때 보통 소화제는 오래걸리나요??   12.13
혈액에서 immunoprecipitation이 가능할까요?   12.13
WB antibody   12.13
Ti plasmid 복제 방법   12.13
gene 합성 주문 관련하여 여쭙니다.   12.13
HepG2 PA 처리 조언 좀 부탁드려요   12.13
western actin 밴드는 보이는데 타킷 밴드가 안보여요   12.13
미생물 보관방법   12.13
(주)루미나노
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크