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 전체 > Molecular Biology-Protein > Extraction/Isolation
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질문 유전자 재조합한 recombinant cloning plasmid 플라스미드 양을 늘리는 방법이 뭔가요?
알Trolli(대학생)  | 2018.08.17 14:31
효소를 발현하여 이용하는데 대량발현이 잘 안되어서 
형질전환을 여러번 해보다보니 재조합 플라스미드가 빨리 닳아서요
매번 클로닝을 맡길수가없는데 
방법이 있다고 들었습니다만 제 선임도 모른다네요 ㅠㅠ 
방법이라도 키워드라도 알고싶습니다. 
#클로닝
 
#재조합
 
#플라스미드
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리절대교주  |  2018.08.17   
플라스미드 벡터가 뭔데요?

그리고 어느 세포에 넣는것인지좀 알려주실래요?

Yeast에 넣어 사용하는거면 좀 다르지만..

cell line에 transfection하는 거라면 간단하게 E.coli에 넣어서 앰플리파이하는 방법이 있어요.

추천 제품은 DH5a(디에이치파이브알파)입니다.

벡터에 항생제 저항성 유전자가 있으면 해당 항생제가 들어간 LB 플레이트를 만들고

유전자를 이콜라이에 트랜스포메이션 해서 넣고 플레이트에 발라서

오버나잇해서 콜로니 뜨면 멸균 이쑤시개로 콕 찝어서 항생제있는 LB배지에서

쉐이킹 인큐베이션하고 많이 크면 플라스미드 프랩 키트로 플라스미드만 뽑아내면 끝.

참 쉽죠....?

실험 배우고 싶으시면 제 교수님과 연락해보시는 것도....?

근데 간단한 실험이라 모르겠네...
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