실험 Q&A Immunology > Immunocytochemistry
ICC(Immunocycochemistry) 결과 사진입니다. paticle 문제 문의드립니다.
레벨4 scientic (과기인)
ICC 결과 현미경 사진 첨부드립니다.
DAPI는 이런일이 발생되지 않는데
Alexa488만 이러한 Paticle이 발생됩니다.
원인 분석을 위해 실험 조건을 적어드립니다.
protocol
- cell seeding / remove media / fixation(Methanol+Acetone, 4'C 20분) / blocking 1hr / sample infection (4'C o/n)
- sampel remove / 1st Ab 1hr, 1:1000, RT / 2nd Ab 1hr 1:2000, RT, Dark / DAPI 1min // mounting
1. 각 과정 사이의 "/"에는 1X PBS로 10분씩 3번 washing 하였습니다. (shaker rpm 90)
2. Fixation solution이 methanol이라 따로 detergent는 추가하지 않았습니다.
3. 1st Ab ab9225, 2nd Ab ab150113 DAPI 1:10000(1ul/10ml) in PBS
4, mounting sol -Dako S3023
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