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레벨2
Histone
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18.06.13 00:53
single 이지 않나요??
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레벨2
superbio
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18.06.13 11:35
보통 reverse transcription 반응은 1cycle 이고,
그리고 RTase에는 RNase H 활성을 갖고 있어 마지막에 RNA를 degradation 시켜서 최종 single 가닥이 되는 것으로 알고 있습니다...
RT-PCR에서 사용되는 cDNA의 경우는 싱글 스트랜드인 mRNA를 리벌스 트랜스크립테이즈를 이용, 싱글 스트랜드인 complementary DNA를 만들게 됩니다. RT-PCR은 이렇게 만든 단일 가닥의 cDNA를 이용하여 자신이 확인 하고자하는 유전자의 발현 정도를 특정 프라이머와 DNA 폴리머레이즈를 이용하여 증폭, 확인하는 방법입니다. 싱글 스트랜드 cDNA는 DNA 폴리머레이즈를 이용하는 RT-PCR 템플레이트로 증폭 가능 합니다. 이때 RT-PCR의 첫번째 사이클은 cDNA의 상보적인 DNA를 만들게 됩니다.
RT-PCR과는 달리 mRNA에서 cDNA 라이브러리를 만드는 경우, 싱글 스트랜드 mRNA에서 리벌스 트랜스크립테이즈를 이용하여 싱글 스트랜드인 cDNA를 만든 뒤, 최초 싱글 스트랜드 cDNA가 만들어질때 첨가되는 3' 쪽 몇 베이스 페어 사이티딘를 인식하는 dG가 포함된 스페시픽한 프라이머와 DNA 폴리머레이즈를 이용하여 싱글 스트랜드인 cDNA와 상보적인 더블 스트랜드 DNA를 만듦과 동시에 이들 모든 cDNA들을 증폭 하게됩니다. cDNA 라이브러리는 이렇게 만들어진 이중가닥 DNA들을 플라스미드 벡터에 넣고난 뒤 만들어지는 cDNA들의 모임입니다.
그러므로 일반적으로 cDNA만을 말하는 경우는 cDNA 라이브러리의 DNA 이중 가닥 모임이 아닌 RT-PCR에서 사용되는 단일 가닥의 complementary DNA를 의미하게 됩니다.
이글 작성전의 분이 cDNA는 더블 스트랜드라고 너무 강력히 주장하셔서 좀 길게 글을 적었는데 지금 확인하니 이전 글이 없어져 버렸네요.
위에 적으신 분들처럼 cDNA는 싱글이 맞습니다.