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질문 loading dye x개념 여쭤봅니다
알세지타(일반인)  | 2018.05.26 20:53
안녕하세요  비전공자입니다.

알바하는곳에서 처음 전기영동을 배우는 중인데
loading dye를 희석하는게 잘 이해가 안가서 질문드립니다.

6x의 완제품을 1x로 희석해서 사용하는데
DNA 1ul에 1x loading dye 5ul씩 섞어서 씁니다.

원래 6x로 사용하는데 DNA의 양이 적을 경우 로딩하기가 힘들기때문에
총 볼륨을 늘리기 위해서 최대 1x까지 희석해서 사용한다고 배웠습니다.
그리고 x개념은 1/n 개념과는 좀 다르다고 배웠습니다.
그래서 1x 짜리를 5ul 넣는다고 하시는데


원래 6x로 사용하는 거라면 샘플1ul에 6ul를 넣는게 맞지 않나요?
여기 어떤글에서 6x 1ul는 1x 짜리를 6ul 사용하는거와 같은 농도라는 내용을 봤는데
이 X의 개념이 샘플양을 포함한 것인가요? 그래서 5ul를 넣는건지..

때에 따라 2x짜리도 사용하는데 이건 또 4ul를 넣으랍니다. (혼돈의 카오스...)
2x 짜리를 사용할땐 3ul 넣는게 맞는거 아닌지요?... DNA는 모두 1ul만 사용합니다..

샘플양 대비 loading dye의 양을 어떻게 맞춰야되는건지 개념이 잡히질 않습니다..

시키니까 그냥 하긴하는데.. 비전공자이긴 하지만 그래도 이화학실험을 했던지라
%, n배수 개념의 희석을 해왔던 저에게는 x라는 개념이 좀 생소합니다.
같은말인데 제가 괜히 헷갈리는건지... 제가 잘못배운건지.....

전공자님들의 답변 부탁드립니다.


#loading dye
 
#2x loading dye
 
#loading dye 희석
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
소리  |  2018.05.26    
6X 짜리를 1X로 희석해서 사용한다고 생각하시면 될 것 같아요
그래서 DNA 5 ul, dye 1 ul를 넣으면 dye가 1/6이 되는거잖아요?
읍 간단한건데 설명하려니 어렵네욥
X를 찐하기??농도??정도 생각하면 될것같아요
2X짜리를 1X로 사용해야한다 하면 1/2 희석하면 됩니다
6X짜리도 마찬가지 이구요! 
개구리Zipnote  |  2018.05.28   
거기 프로토콜이 이상한 겁니다.
$ x concentrate는 최종 부피 대비 1/$ 를 넣어 사용하도록 나온 제품입니다.

6x loading dye는 DNA 5ul + dye 1ul로 총 6ul를 만들어 쓰거나,
DNA 2ul + dye 2ul + dw 8ul로 12ul를 만들어 쓰는 식으로 최종 부피 대비 1/6을 넣으면 됩니다.
말하신 방법으로 쓰려면 1.2x dye를 준비하면 됩니다.

다만, dye 농도 좀 틀렸다고 gel 안 내려가고 하진 않습니다. 반만 넣어도 잘 내려가고, 두 배 넣어도 별 문제 없습니다. 시키는 대로 그냥 하시되, 원리는 정확하게 머릿속에 담아두시면 됩니다.
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