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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 PCR 6 cycles 진행 후 annealing temperature 변경후 재시작.
올챙이왕새우(대학원생)  |  2018.04.20 11:50
PCR 6 cycles 진행 후 annealing 온도가 64도인데 60도로 잘못 설정한 걸 보고,

6 cycles elongation 단계가 지난 후 정지 후 다시 시작하였습니다.


이럴 경우 PCR 과정에 문제가 생길 수 있나요?


답변 부탁드립니다.
#PCR
 
#annealing
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꽃개구리Applied_Microbe  |  2018.04.20   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
60°C에서 primer의 target gene에 대한 특이도가 높다면 문제가 없겠지만 낮다면 non specific band가 나타날 수도 있을것같습니다
단순히 band확인 정도라면 문제는 없겠지만 cloning용이라면 다시 하시는게 좋을것 같네요
초기 PCR조건 잡는과정에서 annealing온도조건이 64°C보나 낮을 때 어떻게 band가 나타났는지 보셔야할것같네요
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