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레벨5
Marine
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17.12.08 19:15
조직또는세포가 Trizol 이 lysis 할 수 있는 capacity 를 넘을정도로 많게 되면 말씀하신 것처럼
Phase seperation 이 잘 되지 않고 Purity 가 낮게 나옵니다.
기존에 쓰시는 것보다 Trizol 을 더 늘려서 써 보시는 것을 추천드립니다.
1000ng/ul 이면 양은 차고 넘친다고 생각됩니다. 1.5 배 내지는 두배 까지 늘려도 좋을 듯 하네요. 또는 Cell 양을 줄여도 되구요.
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레벨3
cell40
(과기인)
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17.12.09 01:08
Marine님 답변 감사드립니다.
10 cm plate에 1 mL을 넣었었는데 아무래도 cell이 너무 많았나 봅니다.
Cell debris가 보이더라고요.
Trizol을 많이 쓰기가 부담스러워서 1.5 mL만 넣어서 해봤는데 그럭저럭 잘 나온 것 같습니다 ^^
또한 검색을 해보니 pipetting이나 vortexing도 좀 더 잘해줬어야 했던 것 같아서
그 부분에도 신경 썼습니다 (저같은 초보자가 나중에 답변을 볼 수도 있어서 적어봅니다 ^^)
감사합니다!!!
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kyongshin
(비회원)
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17.12.11 10:11
안녕하세요
ZymoResearch한국 공식 대리점인 경신과학(주)입니다.
작성자님처럼 RNA가 뽑혔는데, Purity는 안좋고.. 그런데 샘플은 버리기엔 기존에 처리했던 과정이 길고 복잡했기때문에 망했다 싶을때가 있을텐데요,
그럴때는 Spin Column형식 kit중 RNA clean up kit를 사용하실 수 있습니다.일반적으로 RNA외 다른 Purity에 지장을 주는 성분이나, nt등을 제거해주는 제품군입니다.
ZymoResearch에는 해당제품군은 RNA Clean & Concentrator(http://www.zymoresearch.com/rna/rna-clean-up/rna-clean-up-concentration/rna-clean-concentrator-5) 를 참고하시기 바랍니다.
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레벨3
cell40
(과기인)
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17.12.11 23:45
kyongshin님, 제품 정보 감사드립니다 ^^
문제가 반복될 경우 사용하는 것을 고려해 보도록 하겠습니다.