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 전체 > Molecular Biology-RNA > Purification/Isolation
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질문 RNA prep 질문!!!!
알뿡뿡2(과기인)  |  2017.11.28 10:20
RNA prep시에
RNA later에 담겨서 온 sample을 건질때

혹시 RNA later를 깨끗히 제거하지 않은 다음 prep하게 되면 문제가 되나요 ?

혹시 문제가 있다면 왜 rna later가 문제가 되는 이유가 무엇일까요 ?

제가 이론적으로는 좀 부족해서ㅜㅜ

레이터 안에서 티슈가 산산조각 내져 잇어서

레이터를 깨끗히 제거 못하고

액체질소로 그라인딩 했거든요 레이터도 거의 같이

그랬더니 알엔에이가 엄청 나게 깨져서
혹시 레이터 때문인가 싶어 질문합니다 !


#RNA
 
#Prep
 
#Later
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
뒷다리fluhyun  |  2017.11.29   
  어떤 방법으로 RNA prep 을 진행하시는지 모르겠지만,
tri reagent 로 prep 시에, RNAlater 를 제거하지 못하면 10배의 tri reagent를 넣어
prep 을 진행하라고 되어 있고,
또한 이렇게 진행시에 aqueous phase 가 흐려질 수 있으나, RNA recovery 나 quality 에 
영향을 미치지는 않는다고 나와 있고요.
저는 thermofisher 제품을 사용했어서, 그 메뉴얼에 그렇게 있었고요.

thermo 에서는 RNAWiz 라는 것을 사용할때 아래와 같이 하라고 되어 있지만,
Tri reagent 사용시에도 isopropanol 침전시 원래 프로토콜대로 하는것보다 0.5배의 DW를 넣고 총 부피의 1배 isopropanol을 넣어서 prep 하면 더 잘 뽑히기도 했고요.
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