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지나가다
(비회원)
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17.10.09 03:27
아뇨. 1500bp로 나왔다는 건 non-specific band로 생각되네요.
일단 첫번째 잘못 생각하고 있는 부분이 elongation이 덜 된 상황에 다음 스텝으로 넘어가서
1500bp가 생성됐다...인데 그 경우 끝까지 elongation이 되지 못한 fragment에는 priemr가 붙을 수 없겠죠? 끝까지 합성 되어야 그 자리에 primer가 붙을 수 있는 거니까요.
또한, 일반적인 taq의 합성 시간은 보통 1kb/min 으로 흔히 생각하죠.
즉, 2000bp band는 증폭이 안 되었을 수도 있다고 생각합니다. 그러나 1500bp에 non-specific band가 그렇게 강하게 뜨는 걸로 봐서는...원하는 colony가 아닐 수도 있어보이네요
다음에 PCR하실 때에는 2분으로 돌리시는 걸 추천해드려요