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질문 생물 조직에서 mitochondrial activity assay가 어떤 것이 있을까요...?
알실험잘하고싶다(대학생)  | 2017.09.25 14:43
 

조직에서 미토콘드리아 활성 측정을 하고싶은데요,

cell에서는 MTT assay 같은 것을 이용해 독성/미토콘드리아 활성 측정을 하는데

조직의 미토콘드리아 활성측정은 어떻게 하는지 찾고있는데 쉽지 않네요 ㅠㅠ

도움주세요 ㅠㅠㅠ
#mitochondrial
 
#assay
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리절대교주  |  2017.09.26   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

1. 미토콘드리아의 포텐셜 측정
 미토콘드리아에는 전자 전달계가 존재합니다. 그리고 그것이 잘 돌아가면 미토콘드리아의 포텐셜이 증가하여 프로톤의 농도 차이로 ATP를 생산합니다. 다시 말해 포텐셜이 크다는 것은 미토콘드리아의 activity가 크다는 것을 의미합니다. TMRM같은 미토콘드리아 프로톤 다이로 염색하고 CCCP와 같은 인히비터로 프로톤을 leak시켜 플로런스가 증가했다 떨어지는 패턴/시간으로 포텐셜을 비교하면 됩니다. 빠르게 찍을 수 있는 형광현미경이 필수입니다.
난이도 : 상

2. 미토콘드리아 TCA 사이클 효소들의 activity assay
 미토콘드리아에는 TCA 사이클이 존재하며 이것으로 ATP 생산을 합니다. 몇몇 효소는 칼슘이나 인슐린에 의해 영향을 받습니다. 구글에 치면 각 효소들의 activity assay kit가 많이 있습니다. 자신의 실험실의 상황에 맞게 구입해서 쓰면 됩니다.
난이도 : 하

3. OCR(산소 소모율)측정
 Kit로도 나와있기는 하나 최근엔 전용 기계로 (시호스였나?) 측정하는 것이 신뢰성 있다고 보는 추세입니다. 하지만 조직을 보기에는 다소 힘든 경우가 있으며 주로 셀라인을 측정할 때 쓰입니다. 전기자극같은 것을 주면서 측정하기에는 무리가 있으므로 주의를 요망합니다.
난이도 : 중

알실험잘하고싶다  |  2017.09.26   

방법을 세개나 제시해주시다니 감사합니다!!

참고해서 더 알아보도록 할게요!!

정말감사드려요!!!!!

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